是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。冷冻切片的种类较多，有低温恒冷箱冷冻切片法，二氧化碳冷冻切片法，甲醇循环制冷冷冻切片法等。这些方法，随着时代的变迁，科技的发展，许多年前被认为是非常重要的技术，也逐步被淘汰了。当然有些技术，如低温恒冷箱冷冻切片法，正在受到青睐。