羧苄青霉素主要用于绿脓杆菌及部分变形杆菌、大肠杆菌所引起的中耳炎、肺炎、心内膜炎、膀胱炎、肾盂肾炎、手术后的脑膜炎、败血症、胆道感染、皮肤及软组织感染。品用前应作皮试，对青霉素过敏者本品亦忌用。本品毒性较小，但个别亦出现转氨酶升高，停药后可恢复，偶有皮诊。肌肉注射后局部疼痛较明显，故多采用静注。