用以确定核酸中核苷酸序列的一个方法。在分离出单链形式的核苷酸之后，使之与DNA杂合，然后与脱氧核苷酸和2′,3′-双脱氧核苷酸的混合物一起在DNA聚合酶的存在下作恒温培养。